Koronavîrûsa Nû (SARS-Cov-2) Kîta Tespîtkirina Asîda Nukleîk
New Coronavirus(SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit
(Flumadenîscent RT-PCR Probe Method) Product Manual
【Product name 】Koronavîrûsa Nû (SARS-Cov-2) Kîta Tespîtkirina Asîda Nukleîk (Rêbaza Lêkolînê ya Fluorescent RT-PCR)
【Packaging specifications 】25 Test / Kit
【Intended uskalbûn】
Ev kît ji bo tespîtkirina kalîteyî ya asîda nukleîk ji coronavirusê nû di şûşeyên nasopharyngeal, şûşeyên oropharyngeal (qirikê), şûşeyên pozê yên pêş, şûştinên nav-turbinate, şuştina pozê û aspiratên pozê ji kesên ku ji hêla peydakiroxê lênihêrîna tenduristiyê ve bi COVID19 gumanbar in tê bikar anîn. Tespîtkirina genên ORF1ab û N yên coronavirusê nû dikare ji bo teşhîskirina alîkar û çavdêriya epîdemîolojîk a enfeksiyona koronavirusê ya nû were bikar anîn.
【Principles of the procedure 】
Ev kît ji bo sondajên TaqMan yên taybetî û primerên taybetî yên ku ji bo rêzikên genê yên nû (SARS-Cov-2) ORF1ab û N hatine çêkirin, hatî çêkirin. Çareseriya reaksiyona PCR-ê 3 komikên primerên taybetî û sondajên fluorescentî ji bo tespîtkirina taybetî ya hedefan vedihewîne, û komek pêvek ji primerên taybetî û sondajên fluorescentê wekî kontrolkirina standarda hundurîn a kîtê ji bo tespîtkirina genên xaniyek endojen tê bikar anîn.
Prensîba testê ev e ku sondaya fluorescentê ya taybetî ji hêla çalakiya eksonukleazê ya enzîma Taq ve di reaksiyona PCR-ê de tê xemilandin û hilweşandin, ji ber vê yekê koma fluorescentê ya nûçegihan û koma fluorescentê ya qutkirî ji hev têne veqetandin, da ku pergala şopandina floransê dikare floransentek werbigire. sînyala, û dûv re Bi bandora dewlemendkirina zêdekirina PCR-ê, îşaretek fluoresansê ya sondayê digihîje nirxek berbangê-nirxa Ct (Berxa dorhêlê). Di rewşa ku amplikonek armanc tune be, koma nûçegihanê lêpirsînê nêzî koma qutkirinê ye. Di vê demê de, veguheztina enerjiyê ya rezonansê ya fluorescentê pêk tê, û fluoresansa koma nûçegihan ji hêla koma quenching ve tê qutkirin, ji ber vê yekê sînyala fluorescentê ji hêla amûra PCR-a floransê ve nayê tesbît kirin.
Ji bo çavdêrîkirina karanîna reagentan di dema ceribandinê de, kît bi kontrolên erênî û neyînî ve tê saz kirin: di kontrola erênî de plasmîdê rekombînantê cîhê armancê dihewîne, û kontrola neyînî ava distîlkirî ye, ku ji bo şopandina qirêjiya jîngehê tê bikar anîn. Dema ceribandinê tê pêşniyar kirin ku di heman demê de kontrolek erênî û kontrolek neyînî were danîn.
【Main components 】
| Cat. No. | BST-SARS-25 | BST-SARS-DR-25 | Components | |
| Name | Specification | Quantity | Quantity | |
| Kontrola erênî | 180 μL/şûşeyek | 1 | 1 | Plazmîdên ku bi awayekî sûnî hatine çêkirin, ava distîlkirî |
| Kontrola neyînî | 180 μL/şûşeyek | 1 | 1 | Ava distîlkirî |
| SARS-Cov-2 Mix | 358,5 μL/şûşeyek | 1 | / | Cotên pêşîn ên taybetî, sondajên fluorescentê yên tespîtkirina taybetî, dNTPs, MgCl2, KCl, Tris-Hcl, ava distilled, hwd. |
| Enzîm Mix | 16,5 μL/şûşeyek | 1 | / | Enzîmên Taq, transkrîptaza berevajî, enzîmên UNG, hwd. |
| SARS-Cov-2 Mix (Lyophilised) | 25 test / şûşeyek | / | 1 | Cotên pêşîn ên taybetî, sondajên fluorescentê yên tespîtkirina taybetî, dNTPs, enzîmên Taq, transkrîptaza berevajî, ava distîlkirî, hwd. |
| 2x Tampon | 375 μL/şûşeyek | / | 1 | MgCl2, KCl, Tris-Hcl, ava şilandî, hwd. |
Not：(1) Pêkhateyên di kîtên hevrikên cihêreng de nayên tevlihev kirin an guheztin.
(2) Reagenta xwe amade bikin: Kîta derxistina asîda nukleîk.
【Storage conditions û expiration date 】
For BST-SARS-25:Ji bo demek dirêj veguhezînin û hilînin -20±5℃.
For BST-SARS-DR-25:Veguheztin li germahiya odeyê. Ji bo demek dirêj li -20±5℃ hilînin.
Ji çerxên cemidî-germkirinê yên dubare dûr bixin. Demjimêra derbasdariyê bi ceribandinê ji bo 12 mehan tê destnîşankirin.
Ji bo dîroka çêkirin û karanîna etîketê bibînin.
Piştî vekirina yekem, reagent dikare li -20±5 ° C ne bêtir ji 1 mehê an heya dawiya heyama reagentê were hilanîn, kîjan tarîx yekem be, da ku ji dubarekirina çerxên cemidî-germkirinê, û jimara cemidandina reagentê dûr nekevin. - Divê çerxên germkirinê ji 6 caran derbas nebe.
【Applicable instrument】ABI 7500, SLAN-96P, Roche-LightCycler-480.
【Sample requirements 】
Tîpa nimûneya 1.Applicable: Çareseriya asîda nukleîk a derkirî.
2. Hilberîn û veguheztina nimûneyan: 6 mehan li-20±5℃ hilînin. Nimûneyan ji 6 caran zêdetir bicemidin û bihelînin.
【Testing method】
1.Nucleic acid extraction
Ji bo derxistina asîda nukleîk a vîrusê kîtek jêbirina asîda nukleîk a guncan hilbijêrin, û rêwerzên kîtê yên têkildar bişopînin. Tête pêşniyar kirin ku kîtek derxistin û paqijkirina asîda Nukleîk bikar bînin ku ji hêla Yixin Bio-Tech (Guangzhou) Co., Ltd. an jî kîtek paqijkirina asîda nukleîk a wekhev ve hatî çêkirin.
2. Reaction reagent preparation
2.1 For BST-SARS-25:
(1) SARS-Cov-2 Mix û Enzyme Mix rakin, bi tevahî li germahiya odeyê bi cîhaza Vortex-ê bi tevahî tevlihev bikin û dûv re bi kurtî santrîfuj bikin.
(2) 16.5uL Enzyme Mix li 358.5uL SARS-Cov-2 Mix hate zêdekirin û bi tevahî tevlihev kirin da ku çareseriya reaksiyonê ya tevlihev bistînin.
(3) Tîpek oktal a 0,2 mL PCR amade bikin û wê bi 15 uL çareseriya reaksiyonê ya tevlihev a jorîn di her bîrekê de nîşan bikin.
(4) 15 μL çareseriya asîda nukleîk a safîkirî, kontrola erênî û kontrola neyînî lê zêde bikin, û bi baldarî qapaxa lûleya oktalê veşêrin.
(5) Bi berevajîkirina berevajîkirinê, baş tevlihev bikin, û zû santrîfuj bikin da ku şilavê li binê boriyê kom bikin.
1
2.2 For BST-SARS-DR-25:
(1) 375 ul 2x tampon li SARS-Cov-2 Mix((Lyofilîzekirî) zêde bikin da ku tevliheviya reaksiyonê amade bike. Bi pîpîtê tevde tevlihev bikin û dûv re demek kurt santrîfuj bikin. （Piştî ku tevliheviya reaksiyonê hat amadekirin, tê pêşniyar kirin ku di -20℃ de were hilanîn. hilanîna demdirêj.)
(2) Tîpek oktal a 0,2 mL PCR amade bikin û wê bi 15 μL tevliheviya reaksiyonê di her bîrekê de nîşan bikin.
(3) 15 μL çareseriya asîda nukleîk a paqijkirî, kontrola erênî û kontrola neyînî lê zêde bikin, û bi baldarî kapaxa lûleya oktalê veşêrin.
(4) Bi berevajîkirina berevajîkirinê, baş tevlihev bikin, û zû santrîfuj bikin da ku şilavê li binê boriyê kom bikin.
3. PCR amplification (Ji kerema xwe ji bo mîhengên xebatê serî li manuala amûrê bidin.）
3. 1 PCR 8-lûlê têxin hundurê jûreya nimûneyê ya amûra PCR ya florescent, û nimûneya ku were ceribandin, kontrola erênî û kontrola neyînî li gorî rêza barkirinê saz bikin.
3.2 Kanala tespîtkirina fluorescence:
(1) Gena ORF1ab kanala tespîtkirina FAM-ê hildibijêre (Raporter: FAM, Quencher: Tune).
(2) Gena N kanala tespîtkirina VIC-ê hildibijêre (Raporter: VIC, Quencher: Tune).
(3) Gena standarda hundurîn kanala tespîtkirina CY5 hildibijêre (Raporter: CY5, Quencher: Tune).
(4) Referansa Pasîf li ROX tête danîn.
3.3 Mîhengkirina parametreya bernameya PCR:
| Gav | Germahiya (℃) | Dem | Hejmara çerxên | |
| 1 | Reaksiyona veguheztina berevajî | 50 | 15 min | 1 |
| 2 | Çalakkirina enzîma Taq | 95 | 2.5 min | 1 |
| 3 | Çalakkirina enzîma Taq | 93 | 10 s | 43 |
| Berfirehkirin û bidestxistina fluorescenceyê | 55 | 30 s | ||
Piştî sazkirinê, pelê hilînin û bernameya reaksiyonê bimeşînin..
4.Results analysis
Piştî ku bername qediya, encam bixweber têne tomar kirin, û kêşeya mezinbûnê tê analîz kirin. Kevirê amplîfasyonê li ser sindoqa xwerû ya amûrê tê danîn.
【Explanation of test results 】
1. Rastiya ceribandinê diyar bikin: Kanala kontrolê ya erênî FAM, VIC divê xwedan kelekek amplifikasyonê ya tîpîk be, û nirxa Ct bi gelemperî ji 34 kêmtir e, lê dibe ku ji ber mîhengên bendavên cihêreng ên amûrên cihêreng biguhezîne. Kontrola neyînî ya FAM, kanala VIC divê Ct ne-zêdekirî be. Tê pejirandin ku hewcedariyên jorîn divê di heman demê de bêne bicîh kirin, wekî din ev ceribandin nederbasdar e.
2. Dadkirina encam
| Kanala FAM/VIC | Encama dîwanê |
| Ct＜37 | Testa nimûneyê erênî ye |
| 37≤Ct＜40 | Kevirê amplîfasyonê bi teşeya S-yê ye, û pêdivî ye ku nimûneyên gumanbar ji nû ve werin lêkolîn kirin; eger encamên ji nû ve muayeneyê lihevhatî bin, wekî erênî tê nirxandin, wekî din neyînî ye |
| Ct≥40 An Bê zêdekirin | Testa nimûne neyînî ye (an di binê sînorê jêrîn ya tespîtkirina kîtê de) |
Nîşe: (1) Ger hem kanala FAM û hem jî kanala VIC di heman demê de erênî bin, SARS-Cov-2 wekî erênî tê destnîşankirin.
(2) Ger kanala FAM an kanala VIC erênî be û kanala din neyînî be, divê ceribandin were dubare kirin. Ger ew di heman demê de erênî be, ew ê wekî SARS-Cov-2 erênî were darizandin, wekî din ew ê wekî SARS-Cov-2 neyînî were darizandin.
berhemên Related
-
Kîta Tespîtkirina Antibody IgM/IgG COVID-19
Kîta Tespîtkirina Dijberê COVID-19 (Rêbaza Immunochromatografiya Zêrîn Koloidal) Manual 【NAVÊ BERHEMÊ】COVID- 19 IgM/IgG Kit （Testîska Zêrîn 【Rêbaza Îmmunokromatografiya Zêrîn 【Testîvala Zêrîn 【ÎMÛK s/Kit 【 KURTE】 Coronavirusên nû ji cinsê β in. COVID-19 nexweşiyek enfeksiyonê ya tîrêjê ye. Mirov bi gelemperî xeternak in. Heya niha, nexweşên ku bi vîrusa nû ve ketine çavkaniya sereke ne…
-
Kitê Derxistina An Paqijkirina Asîda Nukleîk
Kitê Derxistina An Paqijkirinê ya Asîda Nukleîk an li -20℃ tê hilanîn. Pêdivî ye ku nimûne bi karanîna 0℃ curling were veguheztin. Pêşgotin Kiteya Derxistina An jî Paqijkirina Asîda Nukleîk (Rêbaza Kulîlkên Magnetic) ji bo paqijkirina otomatîkî ya RNA û DNA ji şilavên laş (wekî şûp, plasma, serum) bi karanîna amûrên xweya derxistina asîda nukleîk a otomatîk hatî çêkirin. Teknolojiya parçikên magnetîkî DNA/RNA-ya qalîteya bilind peyda dike ku ji bo ...
-
SARS-CoV-2 Antîgen Kit (Immunochromatogr...
SARS-CoV-2 Kîta Vekolîna Antigenê (Rêbaza Îmmunokromatografiyê) Manuala Hilberê 【NAV BERHEMÊ】SARS-CoV-2 Kîta Tehlîlkirina Antîjenê （Rêbaza Îmmunokromatografiyê) 【TAYBETÊN PACKÊJÎNÊ】 1 Ceribandin/Kitê Coronavirus e. COVID-19 nexweşiyek enfeksiyonê ya tîrêjê ye. Mirov bi gelemperî xeternak in. Heya niha nexweşên ku bi vîrusa koronayê ya nû ketine nexweşên sereke ne…
-
SARS-CoV-2 Kîta Tehlîlkirina Antigenê
SARS-CoV-2 Antîgen Kit (Rêbaza Immunochromatography) Manualê Hilberê 【NAVÊ BERHEMÊ】SARS-CoV-2 Kîta Tehlîlkirina Antîjenê (Rêbaza Immunochromatography) 【TAYBETÊN PAKETINE】 1 Test, 5Kit/Kits TRACT】 The Coronavirusên nû ji cinsê β in. COVID-19 nexweşiyek enfeksiyonê ya tîrêjê ye. Mirov bi gelemperî xeternak in. Heya nuha, nexweşên ku bi vîrusa nû ve ketine çavkaniya sereke ya enfeksiyonê ne; Kesên vegirtî yên bêsîmptom...